Terapia génica dirigida por progenitoras de eritroides utilizando péptidos ligandos TFR1 bifuncionales en la protoporfiria eritropoyética humana

Soy J Hum Genet. 2019 7 de febrero; 104 (2): 341-347. doi: 10.1016 / j.ajhg.2018.12.021. Epub 2019 31 de enero 

Mirmiran A 1 , Schmitt C 2 , Lefebvre T 2 , Manceau H 3 , Daher R 2 , Oustric V 1 , Poli A 2 , Lacapère JJ 4 , Moulouel B 5 , Puy H 2 , Karim Z 1 , Peoc'h K 3 , Lenglet H 1 , Simonin S 6 , Deybach JC 2 , Nicolas G 1 , Gouya L 7 .

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Resumen

La protoporfiria eritropoyética (EPP) es una enfermedad hereditaria caracterizada por una deficiencia en la actividad de la ferrochelatasa (FECH). La actividad FECH es responsable de la acumulación de protoporfirina IX (PPIX). Sin tratamiento etiopatogénico, el EPP se manifiesta como fotosensibilidad severa. El 95% de los individuos afectados presentan una mutación FECH de pérdida de función (LOF) del alelo FECH hipomórfico, lo que resulta en una reducción de la actividad de FECH en eritroblastos por debajo de un umbral crítico. El alelo hipomórfico promueve el uso de un sitio de empalme aceptor críptico, generando un ARNm de FECH aberrante, que es responsable del nivel reducido de ARNm de FECH de tipo salvaje y, en última instancia, de la actividad de FECH. Anteriormente hemos identificado un oligonucleótido antisentido (AON), AON-V1 (V1), que redirige el empalme al sitio del aceptor fisiológico y reduce la acumulación de PPIX. Aquí, desarrollamos una estrategia específica que utiliza el receptor 1 de transferrina (TRF1) como un caballo de Troya para entregar V1 a los progenitores eritroides. Diseñamos un péptido bifuncional (P1 -9R) que incluye un péptido dirigido a TFR1 acoplado a un péptido que penetra en las células (CPP) de nueve argininas que facilita la liberación de AON de TFR1 en vesículas endosómicas. Demostramos que el nanocomplejo P 1 -9R / V1 promueve la redirección eficiente y prolongada del empalme hacia el sitio de empalme fisiológico y la subsiguiente normalización de los niveles de proteína y ARNm WT FECH. Finalmente, el nanocomplejo P 1 -9R / V1 aumenta la producción de ARNm de WT FECH y disminuye significativamente la acumulación de PPIX en cultivos primarios de progenitores eritroides diferenciadores de un individuo manifiesto afectado por EPP. P 1-9R es un método diseñado para atacar a los progenitores eritroides y representa una herramienta potencialmente poderosa para la administración in vivo de ADN terapéutico en muchos trastornos eritroides.

Copyright © 2019 de la Sociedad Americana de Genética Humana. Publicado por Elsevier Inc. Todos los derechos reservados.

PMID:

 

30712775

 

PMCID:

 

PMC6369449

 [Disponible el 2019-08-07]

 

DOI:

 

10.1016 / j.ajhg.2018.12.021

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30712775